期刊简介
本刊是国内外公开发行的国家级学术刊物， 本刊以本专业的科研、教学人员和临床医师及从事骨质疏松的专业和管理人员为主要读者对象，报道本专业领域内国内、外科研的最新成就，临床诊疗经验，以及与此相关的基础理论研究。
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首页>中国骨质疏松杂志
- 杂志名称：中国骨质疏松杂志
- 主管单位：中华人民共和国民政部
- 主办单位：中国老年学和老年医学学会
- 国际刊号：1006-7108
- 国内刊号：11-3701/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
检测破骨细胞内活性氧水平方法的实验探究与应用
史俊；杨柳；黄强；刘建；罗卓荆
关键词：骨质疏松, 破骨细胞, 活性氧, 检测方法
摘要：目的：探究可以有效、准确且直观地检测破骨细胞内活性氧（ ROS）的方法，并应用其对破骨细胞分化过程中活性氧的变化进行检测。方法培养RAW264.7细胞系作为破骨前体细胞。控制细胞密度铺板后装载检测活性氧的2，7-双乙酸二氯荧光素（ DCFH-DA）荧光探针，分别检测阴性对照组（只加α-MEM培养基）、阳性对照组（ ROSup）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）组（100ng／mlRANKL）和N-乙酰左旋半胱氨酸（NAC）组（100ng／mlRANKL＋1mMNAC）破骨细胞的活性氧水平。检测方法包括使用荧光显微镜观察不同组的荧光强度并对阳性细胞计数统计和使用流式细胞仪检测不同组的荧光强度并对Mean FL1-A定量分析。结果阴性对照组与阳性对照组比较，定性的荧光照片和阳性细胞计数统计，与定量的流式细胞术统计图和Mean FL1-A统计分析，都显示阳性对照组的细胞内活性氧水平远高于阴性对照组（ P＜0.001和P＜0.001）。同时， RANKL组的活性氧水平高于阴性对照组（ P＜0.05和 P＜0.01），而 NAC组的水平较RANKL 组为低（ P＜0.001和 P＜0.001）。结论定性观察方法与定量检测方法结果均有效并且高度一致。两种方法的综合使用可以直观准确地检测破骨细胞内的活性氧。使用该方法可验证破骨细胞分化过程中活性氧的增加，并且NAC可抑制此变化。
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