期刊简介
本刊是国内外公开发行的国家级学术刊物， 本刊以本专业的科研、教学人员和临床医师及从事骨质疏松的专业和管理人员为主要读者对象，报道本专业领域内国内、外科研的最新成就，临床诊疗经验，以及与此相关的基础理论研究。
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首页>中国骨质疏松杂志
- 杂志名称：中国骨质疏松杂志
- 主管单位：中华人民共和国民政部
- 主办单位：中国老年学和老年医学学会
- 国际刊号：1006-7108
- 国内刊号：11-3701/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
破骨细胞微管正端蛋白动态成像观察
遆云帆；徐海栋；王瑞；赵建宁
关键词：破骨细胞, 绿色荧光蛋白, 活细胞成像, 细胞骨架, 微管正端蛋白
摘要：目的：采用活细胞成像技术观察破骨细胞微管正端蛋白EB1在细胞内的分布及运动，初步研究微管在破骨细胞功能中的作用。方法①用脂质体转染方法（阳离子脂质体Lip2000）转染EB1?GFP基因至Raw264?7细胞系，G418筛选转染成功的Raw264?7细胞，荧光显微镜下观察后GFP蛋白免疫荧光染色确定稳定转染EB1?GFP的Raw264?7细胞系建立；②活细胞工作站下观察转染EB1?GFP的Raw264?7细胞中EB1蛋白的运动；③用含100ng／mLRANKL和30ng／mL M?CSF的培养基分别诱导稳定转染EB1?GFP的Raw264?7细胞与正常Raw264?7细胞为破骨细胞，进行TRAP染色鉴定，比较两组细胞形态有无差别；④Raw264?7细胞系诱导出破骨细胞后，用细胞免疫荧光染色方法观察破骨细胞EB1蛋白的形态及分布；⑤活细胞工作站下观察稳转EB1?GFP的Raw264?7细胞诱导出的破骨细胞内EB1蛋白的运动状态。结果①脂质体转染方法建立了稳定转染EB1?GFP基因的Raw264?7细胞系；②观察到破骨前体细胞Raw264?7的微管正端蛋白（ EB1）的运动轨迹；③转染EB1?GFP基因的Raw264?7细胞与正常Raw264?7细胞诱导的破骨细胞TRAP染色无明显差别；④活细胞工作站观察破骨细胞微管正端蛋白EB1的运动状态，结果表明破骨细胞微管活动性较破骨前体细胞Raw264?7活动性低。结论①EB1?GFP基因对破骨前体细胞系Raw264?7诱导破骨细胞无明显影响；②微管活动性降低可能与破骨细胞骨吸收活性相关。
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